ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點，而且因為一天之內能夠檢查幾百乃至上千份標本，因此在生物醫學各領域的使用規模日益擴展。
在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并注意不行濺出，不行產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清，可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其中參加血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以確保混和。加酶結合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液器，在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完結需求有必定的溫度和時刻，這一保溫進程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當。
按ELISA試劑盒說明書的要求預備實驗中需用的試劑。ELISA試劑盒頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗刷的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液使用pH計測量較正。從冰箱中取出的實驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
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