將抗原的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
1.食品安全檢測ELISA試劑盒的操作原理：
ELISA的操作步驟：樣品收集保存、試劑準(zhǔn)備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標(biāo)抗體、終止反應(yīng)、結(jié)果判定、
2．影響因素：
分子量、穩(wěn)定性、純化、包被濃度，抗體純度和產(chǎn)品質(zhì)量
盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會影響測定結(jié)果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。
臨床ELISA試劑盒測定中可能會出現(xiàn)的問題及可能的原因
問題可能的原因（非試劑盒本身的原因）
1．弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出 溫育的時間或溫度不夠；顯色反應(yīng)時間太短；所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2．測定的重復(fù)性差 （相同樣本兩次測定結(jié)果不一致） 這是典型的由測定操作引起的問題，包括
（1）加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
（2）加樣過快，孔間發(fā)生污染；
（3）加錯樣本；
（4）加樣本及試劑時，加在孔壁上部非包被區(qū)；
（5）不同批號試劑盒中組分混用；
（6）溫育時間、洗板、顯色時間不一致；
（7）孔內(nèi)污染雜物；
（8）酶標(biāo)儀濾光片不正確；
（9）血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3．白板
（陽性對照不顯色） （1）漏加酶結(jié)合物；
（2）洗板液配制中出現(xiàn)問題，如量筒不干凈，含酶抑制物（如疊氮鈉）等。
（3）漏加顯色劑A或B；
（4）終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4．全部板孔均有顯色 （1）洗板不干凈；
（2）顯色液變質(zhì)；
（3）加底物的吸光受酶污染；
（4）洗板液受酶等污染。
.3關(guān)鍵參數(shù)和功能幅度，相應(yīng)的性價關(guān)系
對于食品檢測ELISA試劑盒來說，進(jìn)口的試劑盒在中國市場上比國產(chǎn)的試劑盒占的份額要大，國產(chǎn)的食品檢測ELISA試劑盒主要是在天然毒素上面，國產(chǎn)的食品檢測ELISA試劑盒是在檢測各種天然毒素上面。就市場上比較早食品檢測ELISA進(jìn)口的主要是：R-biopharm、Neogen國產(chǎn)的試劑盒主要是：近來幾年市面上生產(chǎn)此類食品檢測ELISA檢測試劑盒的公司成長迅速，在中國市面上占份額大的幾個公司：長沙安迪、深圳綠詩源、三方圓、安圖，科華，索奧等 這幾個公司是的食品檢測ELISA試劑盒產(chǎn)品比較多，但是有很多以前做動物酶免檢測試劑盒的公司也正在進(jìn)入食品安全檢測這個市場。
（5）是否需要生產(chǎn)商上門指導(dǎo)等復(fù)雜的
一般性食品檢測ELISA試劑盒的操作比較簡單，不需要生產(chǎn)商去上門指導(dǎo)，而且實驗的成功率也大。
（6）產(chǎn)品是否成熟和試劑的穩(wěn)定性，供應(yīng)商和能否換貨等服務(wù)質(zhì)量
食品檢測ELISA試劑盒試劑已經(jīng)成熟，穩(wěn)定性好，在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用還在擴大；一般在試劑盒出現(xiàn)問題的試劑，只要提供實驗報告和以及殘留試劑，經(jīng)廠家鑒定確實屬于試劑本身問題的，可以提供退換貨服務(wù)。
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