更新時間：2025-06-08
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實驗規(guī)則：
1、底物是光敏感的，要在臨用前現配
2、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸
4、待檢樣品要澄清，否則會影響結果。
5、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定
6、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數據的準確性
7、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證
ELISA試劑盒正確選擇合適的陰性對照：陰性對照的基本組成也應該盡量與檢測樣本的組成一致，好先行檢測確定其中不含待檢物質，檢測成分有：酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B等。
人花生四烯酸5（ALOX-5）elisa試劑盒說明：
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）2-8℃（頻繁使用時）
2．有效期：6個月
3．濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響
5．中、英文說明書可能會有不一致之處， 請以英文說明書為準。
科研試劑盒標本的稀釋原則：首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。后計算濃度時，稀釋了“N"倍，標本的濃度應再乘以“N"。
保質前使用：
1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目，并增加1孔作為TMB空白顯色孔。總數=樣品數+9；做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2．將 2000pg/ml ,1000pg/ml ，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml 的標準品各0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1ELISA試劑盒孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、體液、組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品100μι。
3．酶標板加上蓋，37℃反應90分鐘。
4．反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體；或甩去酶標板內液體，再對著吸水紙拍幾下。不洗。
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